2015年9月18-20日, 由中国生物化学与分子生物学会酶学专业委员会、浙江清华长三角研究院、上海交通大学生命科学技术学院、山东大学(威海)共同主办的第十二届全国酶学学术讨论会在山东威海召开。中科院青岛生物能源与过程研究所微生物资源团队做了"Hyperthermophilic GH11-Family Xylanase from Caldicellulosiruptor sp. F32: Its High-level Expression in Pichia and Enzymological Characters"的海报。
源自嗜高温菌株的木聚糖酶通常具有良好的热稳定性和耐酸碱性,在生物能源、饲料、纺织等多行业中有广泛的应用。前期我们在农村堆肥样品中分离出一株木聚糖酶活性较高的极端嗜热厌氧菌Caldicellulosiruptor sp. F32。通过基因组测序分析、电泳活性条带染色、酶学特性检测等实验,发现并阐明了2个具有高活性和强热稳定性的木聚糖酶(XynA、XynB)。后期实验发现,缺失CBM36模块的截短蛋白XynA-TM1与全长蛋白XynA相比,比酶活提高2.3倍,75 °C半衰期提高8.7倍。为能高效表达此木聚糖酶以广泛应用于工业化生产,我们采用毕赤酵母分泌蛋白表达系统。通过摇瓶发酵、发酵罐发酵、酶学性质对比等实验发现,在毕赤酵母中可获得高产量和高活性的木聚糖酶制剂,为下一步工业化应用提供了可行方案。硕士生王灵荣获中国生物化学与分子生物学会第十二届全国酶学学术讨论会 "优秀论文三等奖"。